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實時熒光定量pcr試劑盒檢驗方法的局限性分析
點擊次數(shù)：1120 更新時間：2021-08-19
實時熒光定量pcr試劑盒在分子生物學研究的應用：
1、核酸定量分析。對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測，RNA基因失活率的檢測等。
2、檢測單核苷酸多態(tài)性對于研究個體對不同疾病的易感性或者個體對特定藥物的不同反應有著重要的意義，因分子信標結(jié)構(gòu)的巧妙性，一旦SNP的序列信息是已知的，采用這種技術(shù)進行高通量的SNP檢測將會變得簡單而準確。
3、基因表達差異分析。比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學處理等)，特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證。
實時熒光定量pcr試劑盒檢驗方法的局限性：
被檢樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中操作方式不當容易造成RNA降解而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
當檢測樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒的低檢出*可能會發(fā)生假陰性的結(jié)果。
樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中發(fā)生交叉污染，則容易得到假陽性結(jié)果。
實時熒光定量pcr試劑盒注意事項：
試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
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