產品名稱：人膀胱癌相關成纖維細胞
產品特點：人膀胱癌相關成纖維細胞公司正在出售的產品人肺轉化細胞;AE1201 人肝竇內皮細胞培養基 人小膠質細胞裂解物HML GP120 Others HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC)人細胞裂解液 NCI-H838(人非小細胞肺癌細胞)
產品型號：
更新日期：2024-12-19
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人膀胱癌相關成纖維細胞的詳細資料：
細胞簡介：
膀胱癌是一種泌尿生殖系統腫瘤，發病率和死亡率較高，膀胱癌分為非肌浸潤性膀胱癌與肌肉浸潤性膀胱癌。
腫瘤微環境理論認為，腫瘤微環境與細胞外基質是腫瘤對化療反應的重要決定因素。腫瘤微環境包括和非細胞，以及細胞外成分，在腫瘤復發和轉移中起著重要的作用。其中，非細胞主要由腫瘤相關成纖維細胞構成。
成纖維細胞是實體瘤中主要的細胞，它們結合結締組織的細胞外基質，是組織結構完整性的基礎。已有研究表明，腫瘤相關成纖維細胞是腫瘤演進的重要促進劑，它們可通過分泌一種或多種可溶性因子如細胞因子、生長因子、趨化因子和基質降解酶等，腫瘤細胞響應這些可溶性因子作用，進而改變腫瘤細胞的生長方式機器發展演進過程。
產品名稱 | 人膀胱癌相關成纖維細胞 | 組織來源 | 膀胱癌組織 |
英文名稱 | Human primary bladder cancer associated fibroblasts;CAFs | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞特性：
1）細胞來源于手術切除的膀胱癌組織。
2)細胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：成纖維樣細胞，貼壁培養。
推薦培養基：
我們推薦使用 delf 原代成纖維細胞培養體系 作為體外培養的培養基。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
公司正在出售的產品：
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注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
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