產品名稱：3T3細胞，小鼠成纖維細胞說明書
產品特點：3T3細胞，小鼠成纖維細胞說明書上海一研生物相關產品：20×SSPE PH7.4 100ml 瓶Naphthol Blue Black 氨基黑10B 5g 瓶Guanidine異硫氰酸胍 100g 瓶Dopamine hydrochloride 5g 瓶兔抗羊IgG-FITC 3ml 支Shanzhiside methylester 山梔苷甲酯 64421
產品型號：
更新日期：2021-04-01
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3T3細胞，小鼠成纖維細胞說明書的詳細資料：
下列是產品的訂購信息：
產品名稱 | 3T3細胞，小鼠成纖維細胞說明書 |
英文名稱 | 3T3 cells, mouse fibroblast cells |
貨號 | EY-X64107 |
細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
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培養操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
20×SSPE PH7.4 100ml 瓶
Naphthol Blue Black 氨基黑10B 5g 瓶
Guanidine異硫氰酸胍 100g 瓶
Dopamine hydrochloride 5g 瓶
兔抗羊IgG-FITC 3ml 支
Shanzhiside methylester 山梔苷甲酯 64421-28-9 20mg
SYBR Green I(PCR級，10000X) 50ul 支
Delfinidol Chloride 化飛燕草素 528-53-0 1mg
植物基因組DNA提取試劑盒 50T 盒
Lysozyme 1g 瓶
兔抗馬IgG-HRP 0.1ml 支
GultathioneStransferases 轉移酶 1mg 瓶
3T3細胞，小鼠成纖維細胞說明書白介素-1受體相關激酶2IRAK 2 0.5mg
白介素-1受體拮抗劑抗原IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide 0.5mg
整合素α7抗原Integrin a7(integrin alpha 7) 0.5mg
粘附分子整合素β1抗原integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 0.5mg
粘附分子整合素α5抗原Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 0.5mg
蛋白質激酶JAK-1抗原JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 0.5mg
整合素αV抗原Integrin alpha V/CD51 peptide 0.5mg
蛋白質激酶JAK-2抗原JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 0.5ml
磷酸化蛋白激酶JAK-2抗原phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 0.5mg
c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) 0.5mg
磷酸化氨基末端激酶1/2/3（pJNK1/2/3）抗原phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0.2ml
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
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