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產(chǎn)品名稱：大鼠食管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：大鼠食管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細(xì)胞裂解液 rEPC，大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 正常人細(xì)胞，Hs 181.Tes細(xì)胞 LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞) CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品型號(hào)：
更新日期：2024-12-10
訪問次數(shù)：304
大鼠食管上皮細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠食管上皮分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長(zhǎng)和心肺的下降，而逐漸增長(zhǎng)。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細(xì)胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦，有保護(hù)作用。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋，其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動(dòng)的滲透壓之下。從組織學(xué)上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細(xì)胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá)。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠食管上皮細(xì)胞 | 組織來源 | 食管組織 |
英文名稱 | Rat Esophageal Epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠食管上皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠食管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人(Cyt-C)試劑盒
Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancyclooxygenase-2,COX-2試劑盒人環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織GSK3β激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit人多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mgS6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸脫氫酶抗原
IL1RL1重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 Protein
IMPA1 Protein Human 重組人 IMP1 / IMPA1 蛋白
IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mgS6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸脫氫酶抗原
IMPA1 Protein Human 重組人 IMP1 / IMPA1 蛋白
HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL1RL1重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 Protein
大鼠食管上皮細(xì)胞人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒
HumanMethylaseELISAKit 人甲基化酶(Methylase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素(irGH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次
HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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