產品名稱：人表皮角質形成細胞
產品特點：人表皮角質形成細胞公司正在出售的產品Hela(人細胞) HT-29(人結腸癌細胞) 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF SK-MES-1細胞，人肺鱗癌細胞 狗腎細胞,MDCK細胞 CM-M066小鼠膀胱成纖維細胞培養基KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a
產品型號：
更新日期：2024-12-11
訪問次數：318
人表皮角質形成細胞的詳細資料：
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介：
人表皮角質形成分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角質形成細胞是一種能合成角質蛋白的上皮細胞，此類細胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖、分化，并在成為角化的角質細胞中，細胞核與細胞器消失，細胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機體尚有保護作用，故不必在洗擦身體時用力搓擦，使其過早脫失。表皮角質形成細胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細胞產生角化并移向表皮。體外培養的表皮角化細胞容易導致終末分化，不能充分增殖。角質形成細胞終產生角質蛋白，在其向角質細胞演變過程中，一般可以分為四層，即基底層、棘層、顆粒層以及角質層。有人把前三層或前二層稱為生發層或馬爾匹基層。此外，在某些部位，特別在掌跖部位，角質層下方還可見到透明層。
產品名稱 | 人表皮角質形成細胞 | 組織來源 | 皮膚組織 |
英文名稱 | Human Epidermal Keratinocyte Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介：
公司實驗室分離的人表皮角質形成層先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人表皮角質形成經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產品：
小鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒
People of coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 人皮質酮/腎上腺酮(CO)檢測試劑盒
HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 人酰化刺激蛋白(ASP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human8-isoprostaglandin,8-iso-PG檢測試劑盒人8異前列腺素(8-iso-PG)檢測試劑盒規格：96T/48T
正常大鼠(SpragueDawley)腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-IgEreceptoraibodyELISAKit小鼠抗IgE受體抗體檢測試劑盒規格：96T/48T
IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein
NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經元素3抗原
ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標簽)
FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白
NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經元素3抗原
CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標簽)
IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein
FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白
ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
小鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 人0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)檢測試劑盒
HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 人胰脂肪酶(PL)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenIerferonα,IFN-α檢測試劑盒雞α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒規格：96T/48T
載玻片細胞DHPR受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)檢測試劑盒規格：96T/48T
人表皮角質形成細胞小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠腺病毒（ADV）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠纖維蛋白肽B（FPB）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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