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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人膠質(zhì)瘤組織源分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見(jiàn)的一類。相對(duì)應(yīng)的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說(shuō)的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常、生長(zhǎng)失去控制、浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征，其發(fā)生是一個(gè)多因子、多步驟的復(fù)雜過(guò)程，分為致癌、促癌、演進(jìn)三個(gè)過(guò)程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細(xì)胞，是一種變異的細(xì)胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同，有無(wú)限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn)，能夠無(wú)限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織。癌細(xì)胞除了分裂失控外（能進(jìn)行多極分裂），還會(huì)局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膠質(zhì)瘤組織源經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠微粒體S轉(zhuǎn)移酶2(MGST2)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： MGST2 ELISA Kit

Niu Bingtong (acetone) ELISA kit for the detection 牛檢測(cè)(acetone)檢測(cè)試劑盒

Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 大鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHPV-IgG(HumanpapillomavirusIgG)ELISAKit人狀瘤病毒抗體IgG

細(xì)胞P38β2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitAβ1-40大鼠β淀粉樣蛋白1-40

HA重組甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

SCF (Stem Cell Factor 0.5mgSCF (Stem Cell Factor) 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗原

REG4重組人 REG4 / RELP / GISP 蛋白 Protein

CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

SCF (Stem Cell Factor 0.5mgSCF (Stem Cell Factor) 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗原

CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

REG4重組人 REG4 / RELP / GISP 蛋白 Protein

小鼠鐵蛋白(FE)ELISA 試劑盒 96T/48T

Siated muscle actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α )檢測(cè)試劑盒

Humanmannosereceptor,MRELISAKit 人甘露糖受體(MR)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1檢測(cè)試劑盒雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人膠質(zhì)瘤組織源細(xì)胞小鼠特異生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒   小鼠特異生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠特異生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠特異生長(zhǎng)因子試劑盒、小鼠特異生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠壞死因子檢測(cè)試劑盒   小鼠壞死因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠壞死因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠壞死因子試劑盒、小鼠壞死因子檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠總補(bǔ)體檢測(cè)試劑盒   小鼠總補(bǔ)體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠總補(bǔ)體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠總補(bǔ)體試劑盒、小鼠總補(bǔ)體檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠總腺原酸檢測(cè)試劑盒   小鼠總腺原酸試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠總腺原酸試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠總腺原酸試劑盒、小鼠總腺原酸檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。