產(chǎn)品名稱：兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)
產(chǎn)品特點：兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細胞裂解液 滑膜細胞培養(yǎng)基SM-prf IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人細胞裂解液 RSPO2 Protein Human 重組人 FTLS / RSPO2
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-12-13
訪問次數(shù)：270
兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)的詳細資料：
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介：
兔骨髓樹突狀分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的；樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞，典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導成的單核細胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導而成，多數(shù)呈懸浮生長， 細胞呈圓形，細胞體積進一步增大，表面大量粗細不等的樹枝樣突起（高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ），伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志，主要通過形態(tài)學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子，進而激活T淋巴細胞，誘導免疫應答，處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應答，不能激活T細胞的信號，可導致T細胞無能，從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低，一般在30%以下。
產(chǎn)品名稱 | 兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞) | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Rabbit Bone Marrow Immature Dendritic Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介：
實驗室分離的兔骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細胞形態(tài)等綜合鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細胞形態(tài)：圓形、梭形、多角形，形態(tài)多樣
傳代特性：屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒
Human vacuolating cytotoxin associated protein A (VacA) ELISA Kit 人空泡毒素相關蛋白A(VacA)檢測試劑盒
Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 人α2抗纖溶酶(α2-AP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(Mouseovariancancermarker-CA125)ELISAKit小鼠卵巢癌標志物CA125
飲料乙比色法定量檢測試劑盒20次
MouseIerleukin9,IL-9ELISAKit小鼠白介素9(IL-9)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
SPINT2重組小鼠 HAI-2 / SPINT2 蛋白 Protein
CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙酰受體α7(多肽)
RAC2重組人 RAC2 蛋白 Protein
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白
ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (His & Fc 標簽)
CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙酰受體α7(多肽)
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白
SPINT2重組小鼠 HAI-2 / SPINT2 蛋白 Protein
ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (His & Fc 標簽)
RAC2重組人 RAC2 蛋白 Protein
豚鼠端粒酶(TE)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytokeratin 19 (CK-19) ELISA Kit 人細胞角蛋白19(CK-19)檢測試劑盒
HumanSS-B/LaAibody,ELISAKit 人抗SS-B/La抗體檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclin-D1檢測試劑盒人細胞周期素D1(Cyclin-D1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織FGR激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanpreptinELISAKit人preptin檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)人主要組織相容性復合體Ⅱ類檢測試劑盒 人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人主要組織相容性復合體Ⅱ類試劑盒、人主要組織相容性復合體Ⅱ類 檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人主要組織相容性復合體Ⅰ類檢測試劑盒 人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒、人主要組織相容性復合體Ⅰ類 檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人軸突生長誘向因子4檢測試劑盒 人軸突生長誘向因子4試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人軸突生長誘向因子4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人軸突生長誘向因子4試劑盒、人軸突生長誘向因子4 檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人軸突生長誘向因子1檢測試劑盒 人軸突生長誘向因子1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人軸突生長誘向因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人軸突生長誘向因子1試劑盒、人軸突生長誘向因子1 檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
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