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產(chǎn)品名稱：小鼠表皮角化上皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：小鼠表皮角化上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0] 大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞，HEL299細(xì)胞 PT67細(xì)胞，鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞 PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 MSLN Others
產(chǎn)品型號(hào)：
更新日期：2024-12-16
訪問(wèn)次數(shù)：277
小鼠表皮角化上皮細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過(guò)程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠表皮角化上皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 皮膚組織 |
英文名稱 | Mouse Epidermal keratinized epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化上皮先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠乙醇脫氫酶1(ADH1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ADH1 ELISA Kit
Mouse terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)檢測(cè)試劑盒
MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAkit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit人降解加速因子
細(xì)胞Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
PPAR-γ大鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ
PVRL2重組人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
黏病毒耐藥蛋白1(MX1)重組蛋白 Recombinant Myxovirus Resistance 1 (MX1)
IFNA8重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 Protein
CRABP2 Protein Human 重組人 CRABP2 蛋白
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
黏病毒耐藥蛋白1(MX1)重組蛋白 Recombinant Myxovirus Resistance 1 (MX1)
CRABP2 Protein Human 重組人 CRABP2 蛋白
PVRL2重組人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
IFNA8重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 Protein
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human urinary protein (UP) ELISA Kit 人尿蛋白(UP)檢測(cè)試劑盒
HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigleukoieneD4,LT-D4檢測(cè)試劑盒豚鼠白三烯D4(LTD4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞壁可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseCA724ELISAKit小鼠標(biāo)志物(CA724)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠表皮角化上皮細(xì)胞小鼠腦素/腦尿肽(BNP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠腦脊髓病毒（TMEV）檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠腦紅蛋白(NGB)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠腦啡肽（ENK）檢測(cè)試劑盒 96T 試劑盒 組裝/原裝
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